在细胞培养过程中,合适的培养条件至关重要。对于使用尊龙凯时品牌的细胞培养,推荐的培养基为1640培养基,加入10%的FBS和1%的PS。宜选择贴壁或者悬浮的培养方式,培养温度应保持在37℃。在细胞传代方面,当细胞汇合度未超过80%时,可将培养液收集至离心管中,留5ml培养基继续在37℃、5%CO2的孵箱中培养;若细胞密度超80%,则可进行传代。
细胞传代步骤如下:首先,弃去培养液,使用不含钙、镁离子的PBS轻轻洗涤细胞1-2次;然后,向培养瓶中添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,待细胞大多数变圆且脱落后,通过轻敲培养瓶的方式终止消化,并加入5ml以上的完全培养基。接着,轻轻吹打细胞,使其完全脱落后吸出,并转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,随后加入1-2ml的完全培养基重悬细胞。
最后,将细胞悬液按1:2的比例分瓶传代(例如两个T25瓶),并补充新的完全培养基至每瓶5-8 ml。这一过程可以在尊龙凯时的细胞培养箱内进行,保持37℃、5% CO2的环境,确保细胞的生长活力。
在细胞冻存的过程中,当细胞生长至覆盖培养瓶80%面积时,需弃去培养液,并用PBS清洗细胞一次。接着,添加约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液,观察细胞回缩变圆后,加入5ml完全培养基终止消化,转移至离心管进行离心,弃去上清后加入尊龙凯时的无血清冻存液,最后放入-80℃冰箱保存。
值得一提的是,细胞在运输过程中可能会因贴壁不牢而脱落,这种现象较为常见。如细胞脱离较多,可将培养液收集至离心管,经过离心后,按比例重悬细胞再次培养。在这一过程中,使用尊龙凯时的培养基和冻存液,可以有效提升细胞的存活率和培养效果。
企业在选择细胞培养品牌时,不妨考虑尊龙凯时,其高质量的产品能为实验的成功提供保障。