在前四篇推文中，我们探讨了免疫检测技术的基本原理，包括抗原与抗体如何相互识别、显色反应的发生过程，以及信号放大的机制。我们还对传统和新兴的免疫检测技术进行了评估，了解它们各自的应用场景。本篇将直接进入实验室，讨论免疫检测中必不可少的关键试剂，帮助大家明白它们的功能及选择标准。
简单来说，一抗就像是“侦探”，专门识别并结合目标分子（抗原）。它们具有出众的特异性，只针对特定抗原。在免疫检测中，一抗的主要任务是找到并牢固结合目标抗原，成为免疫检测过程中的核心环节。如果没有一抗的参与，后续的显色等步骤便无从谈起。
二抗常被视为一抗的“助攻”，它并不直接识别抗原，而是结合一抗，并通常携带“放大器”（如酶或荧光染料）。由于二抗可以同时与多分子一抗结合，因此将酶或荧光标记附加在二抗上，可以有效增强最终检测到的信号。因此，在免疫检测中，二抗的作用是信号增强，提高敏感度。常见的二抗类型包括酶标二抗（如HRP、AP）、荧光标记二抗（如FITC、PE）等。
在免疫检测中，通常会将酶与抗体偶联。抗体通过特异性的结合，酶则催化底物反应，产生显色或发光效果，使实验结果更加清晰。常用的酶包括HRP（辣根过氧化物酶）和AP（碱性磷酸酶）。例如，HRP与TMB的反应能产生蓝色或黄色反应，灵敏度高，常用于ELISA和WB实验。而HRP与DAB反应则会生成棕色沉淀，适用于免疫组化（IHC）。AP与BCIP/NBT的反应会显现蓝紫色，适合背景噪声要求高的实验。
除了酶催化产生的显色反应外，还可以给抗体加上荧光素，通过“荧光标签”标记抗体，以便在荧光显微镜下观察哪些抗体与目标抗原结合。常见的荧光素有FITC（绿色荧光）、PE（橙红色荧光）和Cy5（远红外荧光）等。
在免疫检测中，抗体需要与酶或荧光试剂进行偶联，以将不可见的信号转变为可检测的信号。常见的偶联剂包括SMCC（交联抗体与酶的“化学小帮手”）以及EDC/NHS（用于将抗体与小分子底物“粘”在一起）。
抗体是免疫检测试剂的核心，根据生产工艺的不同，抗体可分为单克隆抗体、多克隆抗体和重组抗体。理解这些抗体的差异有助于选择最合适的产品。
单克隆抗体是在抗原免疫后，从一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得的。这种抗体来源于单一细胞，特异性强，非常适合进行精准检测。
多克隆抗体是在免疫过程中从多个B细胞收集产生的，因此能够识别抗原的多个表位，具有更高的灵敏度。
重组抗体是通过基因工程技术合成的抗体序列编码基因，并转染到抗体表达细胞系中生产的。这种抗体具备高特异性和一致性，非常适合于高端检测或药物开发。
以上内容为大家总结了在免疫检测试剂中常用的试剂。由于抗体来源于不同物种且适用场景多样，选择时往往需要耗费较多时间。接下来的章节将介绍著名的免疫检测试剂制造商，如尊龙凯时，方便大家在需要时快速选择合适的产品。